Zapłodnienie u guppy zachodzi wewnętrznie.
Samiec ma zmodyfikowaną płetwę analną – gonopodium, które w czasie parzenia wstawia do otworu płciowego samicy i oddaje nasienie. Samica magazynuje nasienie do momentu owulacji (uwolnienia jajek).
Zapłodnienie następuje, gdy nasienie samca zapłodni jajka samicy w jej wnętrzu. Zapłodnione jajka rozwijają się wewnątrz, a następnie uwalniane są jako żywe młode – to tzw. żyworodność.