Pająki to głównie drapieżne bezkręgowce, dieta zależy od gatunku, rozmiaru, siedliska.
Owady
Większość: muchy, mrówki, chrząszcze, motyle, konikowe, świerszcze. Pająki sieciowe łapią latające, łowne gonią po ziemi.
Inne bezkręgowce
Niektóre: wielonóżki, mnionóżki, skorpiony, pseudoskorpiony, inne pająki.
Małe kręgowce
Duże gatunki potrafią złapać: jaszczurki, żaby, ryby, węże, gryzonie – trujące i siecią.
Rośliny i krew
Rzadko: pyłek, nektar, sok roślinny. Kilka gatunków (np. pająk wampir) pije krew kręgowców.
Rola ekologiczna
Jako drapieżnicy oportunistyczni pająki kontrolują populacje owadów, utrzymują równowagę ekosystemów.