Przygotowanie do badania kału i krwi w medycynie weterynaryjnej
W praktyce weterynaryjnej przygotowywanie lamelków mikroskopowych to standardowa procedura przy badaniu kału i krwi. Badanie kału (koproskopia) to mikroskopowa analiza fekalii, zalecana u zwierząt z biegunką, dopieraniem lub wymiotami. Składa się z dwóch części: flotacji kału i bezpośredniego rozmazu kału. Flotacja służy wykrywaniu jaj pasozytów jelitowych (np. nicieni, kątnicy, włóknicy, taśmicy, kokcydii, lamblii). Bezpośredni rozmazu kału pozwala ocenić nadrozkład bakteryjny w przewodzie pokarmowym. Rozmaz krwi (rozmaz krwi obwodowej) ocenia morfologię erytrocytów, leukocytów i płytek krwiowych, co pomaga diagnozować wiele chorób.
Potrzebne materiały
- Pojemnik do flotacji kału
- Płyn do flotacji kału (np. roztwór sitarczyku magnezu, cynku lub glukozy)
- Klamki pokrywkowe
- Lamelki mikroskopowe
- Zapalniczka
- Zestaw do barwienia Gramem
- Ręcznik papierowy
- Mikroskop
- Naczynia hematokrytowe (kapilary)
- Zestaw do barwienia Diff-Quick (lub May-Grünwald-Giemsa)
Instrukcja krok po kroku
1. Flotacja kału
- Pobranie próbki kału. Właściciel może przynieść próbkę lub weterynarz pobiera ją pętlą rektalną (1–3 cm wglęb, zależnie od wielkości zwierzęcia).
- Umieszczenie materiału w pojemniku. Komercyjne pojemniki przypominają probówkę lub fiołek.
- Dodanie płynu flotacyjnego. Napełnij pojemnik do połowy płynem, wstrząśnij pętlą, by rozpuścić kał, a następnie dopełnij płynem do samego górnego brzegu (utworzy się miniskus).
- Nakładanie klamki. Połóżklamkę na wierzchu pojemnika i odczekaj 10 minut. Jaja pasozytów wypłyną na powierzchnię i przylgną do klamki.
- Przeniesienie na lamelkę. Zdejmijklamkę i połóż na lamelce mikroskopowej (materiał międzyklamką a lamelką). Preparat gotowy do oceny mikroskopowej.
2. Bezpośredni rozmaz kału (Direct Fecal Smear)
- Pobranie małej ilości kału. Objętość ok. połowy monety 10 groszy.
- Rozciągnięcie na lamelce. cienką warstwą równomiernie pokrywającą lamelkę (można użyć drugiej lamelki do rozprowadzenia).
- Fiksacja termiczna. Delikatnie ogrzej czystą stronę lamelki zapalniczką przez 5–10 sekund – to wysusza materiał i przywiązuje go do szkła.
- Barwienie Gramem. Wykonaj standardowy protokół barwienia Gramem.
- Suszenie. Ustaw lamelkę pionowo z ręcznikiem papierowym pod spodem, by odchłonął nadmiar barwnika. Czas suszenia ok. 15 minut. Potem gotowa do analizy.
3. Rozmaz krwi (Blood Smear)
- Pobranie krwi obwodowej. Tylko w gabinecie weterynaryjnym – z żyły nogi do rurki z hepariną lub EDTA (antykogulant).
- Przygotowanie kropli. Igłą strzykawką pobierz odrobinę krwi, wstrzyknij do naczynia hematokrytowego, a z niego upuść kropelkę na lamelkę.
- Rozciąganie rozmazu (metoda "wędkarza"). Druga lamelka pod kątem ok. 45° (jak wskazówki zegara 10:15 – "godzinowa" to rozciągająca, "minutowa" z kropką). Przesuń lamelkę "godzinową" wzdłuż "minutowej", ciągnąc kropkę za sobą.
- Suszenie w powietrzu. 5–10 minut.
- Barwienie Diff-Quick. Zmaczaj w roztworach Diff-Quick (zwykle 3 naczynia: fiksator, barwnik eozynowy, barwnik tiazynowy) po kilka sekund, płucz wodą, osusz pionowo z ręcznikiem 5–10 min. Preparat gotowy.
Uwaga: Wszystkie preparaty oceniany przez doświadczonego weterynarza lub technika laboratoryjnego.