Faza przygotowawcza: Na tym początkowym etapie 6-węglowa cząsteczka cukru (zwykle glukozy) jest dwukrotnie fosforylowana, tworząc fruktozo-1,6-bisfosforan. Proces ten wymaga wprowadzenia 2 cząsteczek ATP i wykorzystuje enzymy heksokinazę i fosfofruktokinazę.
Faza dekoltu: Na tym etapie fruktozo-1,6-bisfosforan jest rozszczepiany na dwa 3-węglowe cukry:aldehyd 3-glicerynowy (GAP) i fosforan dihydroksyacetonu (DHAP). Te dwie cząsteczki można wzajemnie przekształcać i obie mogą przechodzić dalej na szlaku.
Faza wypłaty: Ten ostatni etap obejmuje konwersję GAP i DHAP w pirogronian, generując w tym procesie ATP i NADH. Ten etap składa się z kilku etapów enzymatycznych, w tym reakcji fosforylacji i utleniania na poziomie substratu. Ostatecznie powstają 2 cząsteczki pirogronianu oraz łącznie 4 cząsteczki ATP i 2 cząsteczki NADH na każdą cząsteczkę glukozy, która wchodzi do glikolizy.