Dieta pająków mocno się różni w zależności od gatunku i siedliska, ale typowe ofiary to:
- Owady: Muchy, komary, karaluchy, mrówki, chrząszcze, świerszcze.
- Inne bezkręgowce: Robaki, ślimaki, inne pająki, wielonogi.
- Małe kręgowce: Większe gatunki mogą jeść jaszczurki, żaby, małe gryzoń, ptaki, ryby.
- Materiał roślinny: Kilka gatunków spożywa nektar, pyłek lub gnijącą materię roślną.
Pająki zazwyczaj używają jadu lub pajęczyny do złapania ofiary przed zjedzeniem.