1. Cienka warstwa peptydoglikanu:bakterie Gram-ujemne, w tym Salmonella, mają stosunkowo cienką warstwę peptydoglikanu w ścianach komórkowych w porównaniu z bakteriami Gram-dodatnimi. Peptydoglikan to polimer podobny do siatki, który przyczynia się do wytrzymałości i sztywności ściany komórkowej.
2. Membrana zewnętrzna:bakterie Gram-ujemne, w tym Salmonella, posiadają błonę zewnętrzną oprócz błony cytoplazmatycznej. Membrana zewnętrzna jest unikalną cechą, która odróżnia bakterie Gram-ujemne od bakterii Gram-dodatnie.
3. Lipopolisacharyd (LPS):Zewnętrzna błona salmonelli zawiera cząsteczki lipopolisacharydowe (LPS). LPS jest złożoną cząsteczką składającą się z lipidów i polisacharydów. Część lipidowa LPS, znana jako lipid A, jest odpowiedzialna za właściwości endotoksyczne bakterii Gram-ujemnych.
Barwienie Gram obejmuje następujące kroki:
1. Barwienie fioletu krystalicznego:Wszystkie bakterie są zabarwione barwnikiem fioletowym krystalicznym, który wchodzi zarówno w komórki bakteryjne Gram-dodatnie, jak i Gram-ujemne.
2. Roztwór jodu jodu Grama:Roztwór jodu Gram jest dodawany jako mordant, który pomaga ustabilizować kompleks krystaliczny fioletowo-jod w komórkach bakteryjnych.
3. Krok odbarwiania:Plainowane komórki są następnie traktowane środkiem odkręcającym alkohol-aceton. Bakterie Gram-dodatnie zachowują kompleks krystaliczny fioletowo-jodowy, podczas gdy bakterie Gram-ujemne tracą barwnik.
4. Starma przeciwstaja Safranina:Wreszcie odchwycone bakterie Gram-ujemne są kontrastowe safraniną, która nadaje im różowy lub czerwony kolor.
Po zakończeniu tych kroków bakterie Gram-dodatnie wydają się fioletowe pod mikroskopem z powodu zachowanego fioletu krystalicznego, podczas gdy bakterie Gram-ujemne, w tym Salmonella, wydają się różowe lub czerwone z powodu przeciwstronna safraniny.
Ogólnie rzecz biorąc, Salmonella jest Gram-ujemna ze względu na cienką warstwę peptydoglikanu, obecność błony zewnętrznej z lipopolisacharydami (LPS) i jej negatywną reakcję na procedurę barwienia gramu, co powoduje różowe lub czerwone zabarwienie.